期刊简介
中国血液流变学杂志1991年创刊，为中国科学技术协会主管，中国生物医学工程学会主办的该学科唯一期刊。编辑委员会荟萃了全国该学科著名专家，具有学术权威性。本刊被多家数据库收录，为国家科技部中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）。本刊设置基础研究、临床研究、方法与技术、药物应用、综述、讲座等栏目。欢迎相关学科专家来稿。本刊将继续保持已有特色，与时俱进，改进办刊理念，提高时效性、先进性、可读性，热忱为广大读者、作者服务。 《中国血液流变学杂志》第五届编辑委员会名单：首席顾问：阮长耿；顾问：包仕尧，施永德，文宗曜，雷震甲；编辑委员会主任：葛建一；编辑委员会副主任：廖福龙，侯建全，王天佑；主编：王天佑；委员（按姓氏笔划排列）：王天佑，王兆钺，王淑荣，王瑞兴，龙建军，孙汉英，严文华，杨向军，杨建平，杨炳华，吴刚，吴德沛，何作云，沈振亚，张世明，张庆富，张周良，张晓膺，侯建全，姜瑾，洪志成，高泉根，涂友斌，戚其学，葛建一，董万利，覃军，廖福龙，缪丽燕，魏茂元；责任编辑：王军
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- 杂志名称：中国血液流变学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国生物医学工程学会,苏州大学
- 国际刊号：1009-881X
- 国内刊号：32-1625/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
VEGF165基因重组腺病毒载体的构建及其促血管形成作用
贾红亮；谢宇锋；杨吉成；盛伟华；孙凌；吕海涛
关键词：血管内皮生长因子165, 腺病毒载体, 表达
摘要：目的 构建携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因的腺病毒表达载体(Ad-VEGF165),并观察其感染QBI-293A靶细胞后日的基囚的表达及促进血管形成的作用.方法 以含有VEGF165基因片段的pSV-K3-VEGF165质粒为模板,PCR扩增获得的VEGF165目的 片段(Xho l、EcoR V)亚克隆至GFP标记的pAdTrack-CMV载体中构建重组转移质粒pAdTrack-CMV-VEGF165,行PCR、双酶切和DNA测序鉴定.将测序正确的pAdTrack-CMV-VEGF165质粒经Pine I线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-VEGF165(pAd-VEGF165).再经Pac I线性化后用脂质体转染QBI-293A包装细胞,通过多轮扩增和氯化铯密度梯度离心纯化获得Ad-VEGF165重组腺病毒.RT-PCR和ELISA检测腺病毒介导的外源性VEGF165基因在QBI-293A细胞中的转录和表达.将孵育8d的生长状态良好的鸡胚随机分成Ad空载体腺病毒组、Ad-VEGF165重组腺病毒组、NS组.采用鸡胚尿囊膜(CAM)法检测VEGF165重组腺病毒促进尿囊膜血管形成活性.结果 PCR、双酶切和测序鉴定结果 证实成功构建了pAdTrack-CMV VEGF165重组转移质粒,并获得了高滴度的Ad-VEGF165重组腺病毒,其病毒效价可达2×1010pfu/mL.Ad-VEGF165感染后,QBI-293A细胞中的VEGF165含量较QBI-293A细胞对照组和Ad空病毒感染组均明显升高(P<0.05).Ad-VEGF165组与Ad.空载体组和NS组比较,CAM三级分支血管牛长更旺盛,毛细血管更丰富(p<0.05).结论 成功获得了携带人VEGF165基因的腺病毒表达载体,具有明显的促CAM血管形成活性,为进一步开展VEGF165基因修饰干细胞的应用研究奠定了实验基础.
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